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纳米颗粒跟踪分析(NTA)技术测定 外泌体浓度、粒径大小及表型

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NTA(Nanoparticle Tracking Analysis)技术已被外泌体研究领域认可为外泌体表征手段之一;本实验室所使用的仪器Zetaview包含的微电泳技术,也可进行zeta电位的检测。目前配备为488nm波长的激光器,且搭配对应的滤光片,可以测量荧光抗体标记的外泌体 。

除外泌体以外,本实验室也接收微囊泡、脂质体、蛋白、生物纳米材料等样本。


NTA服务简介

实验室采用Zetaview(品牌:Particle Metrix)进行外泌体浓度粒径测试服务。其方法即纳米颗粒跟踪分析(Nanoparticle Tracking Analysis,NTA),原理是对每个颗粒的布朗运动进行追踪和分析,结合Stockes-Einstein方程式计算出纳米颗粒的流体力学直径和浓度。NTA技术已被外泌体研究领域认可为外泌体表征手段之一;相较于其他表征方式,NTA技术的样本处理更简单、更能保证外泌体原始状态、检测速度更快。Zetaview包含的微电泳技术,也可进行zeta电位的检测。

目前配备为488nm波长的激光器,且搭配对应的滤光片,可以测量荧光抗体标记的外泌体。


检测平台介绍
本实验室使用的Zetaview具体品牌、软件版本信息如下:
ZetaView PMX 110 (Particle Metrix, Meerbusch, Germany)
ZetaView 8.04.02  SP2 (2018/5/21前为ZetaView 8.04.02)

样本准备
1. 提供外泌体悬液即可,未纯化样本也可以上机检测;
注意:NTA仅提供粒径分布情况和颗粒浓度,无法区分外泌体与非外泌体成分;当然也可先利用外泌体特异性标记物进行荧光标记,则可以获知外泌体特定亚群的含量。
2.仪器的最佳检测区间是10^7 particles/ml,且有浓度检测下限,为10^5 particles/ml,进样量不少于2ml;一般来说,会对样本稀释后进样;
我司无法准确建议送样量;检测需要量与样本本身浓度有关,样本浓,则用量小,反之则多,根据检测经验,样本取用量一般在2µl-100µl不等,取用量大于50µl时大多由于样本分泌量过低、提取失败或者对样本有过多稀释。一般建议送样量不低于30µl,如样本珍贵,可联系我司寄回,运费视具体情况收取。